第一章
家蚕与家蚕转基因
第一节 家蚕
第二节 家蚕转基因
一、 家蚕转基因的特点 /
二、 家蚕转基因的早期研究 /
三、 家蚕转基因研究现状与发展 /
参考文献
第二章
家蚕转基因的载体构建
第一节 目的基因的获得
一、 从基因组DNA文库获取目的基因 /
二、 从cDNA文库获取目的基因 /
三、 通过PCR技术分离目的基因 /
四、 利用电子克隆获取目的基因 /
五、 人工合成目的基因 /
第二节 启动子的选择
一、 组成型启动子 /
二、 诱导型启动子 /
三、 组织特异性启动子 /
四、 家蚕RNA聚合酶Ⅲ启动子 /
第三节 标记基因
一、 荧光蛋白基因 /
二、 荧光素酶基因 /
三、 抗性筛选基因 /
四、 其他可视化标记基因 /
第四节 调控元件
一、 内含子 /
二、 增强子 /
三、 非翻译区 /
四、 绝缘子 /
五、 其他调控元件 /
第五节 家蚕转基因常用载体
一、 转座载体 /
二、 基因打靶载体 /
三、 人工核酸酶表达载体 /
四、 其他类型载体 /
第六节 转基因载体构建流程
一、 pSL-FibH-EGFP-LBS中间载体的构建 /
二、 piggyBac重组转座载体的构建 /
参考文献
第三章
家蚕外源基因导入技术
第一节 胚胎显微注射技术
一、 家蚕胚胎显微注射仪器的诞生与发展 /
二、 家蚕胚胎显微注射操作流程 /
第二节 精子介导基因转移技术
一、 家蚕精子介导转基因技术的建立 /
二、 家蚕精子介导转基因操作流程 /
第三节 其他外源基因导入技术
一、 电穿孔法 /
二、 压力渗透法 /
三、 基因枪法 /
四、 病毒介导法 /
五、 脉冲场电泳法 /
参考文献
第四章
转基因家蚕的筛选与鉴定
第一节 转基因家蚕的筛选
一、 荧光标记 /
二、 显性颜色变化标记 /
三、 其他表型变化识别标记 /
第二节 外源基因的整合与表达分析
一、 外源基因的整合分析 /
二、 外源基因的表达分析 /
第三节 外源基因表达产物的生物活性及功能检测
一、 表达产物的生物活性分析 /
二、 表达产物的功能测试 /
第四节 内源基因定点突变家蚕的鉴定
一、 T7E1酶切鉴定内源基因定点突变家蚕 /
二、 其他鉴定突变个体的核酸内切酶 /
三、 限制性内切酶酶切检测法 /
参考文献
